原理:
T细胞受体 (T cell receptor,TCR) 与抗原呈递细胞 (antigen-presenting cell,APC) 的表面肽-主要组织相容性复合物(peptide-major histocompatibility complex,pMHC)结合而识别抗原,继而活化T细胞。根据该原理,可以利用pMHC复合物检测抗原特异性T细胞。
但是,当pMHC处于单体 (Monomer) 状态时,对TCR的亲和性较低,且二者的结合不稳定,因此很难将单体作为检测工具使用。若将pMHC生物素化,通过链霉亲和素将pMHC单体四聚体 (Tetramer) 化就可以使其与TCR保持在一个稳定的结合状态,成为可以利用的检测工具。

pMHC 的单体与TCR的亲核性较低,无法稳定结合,因此无法用来检测特异性CTL。

pMHC的单体与TCR的亲核性较低,无法稳定结合,因此无法用来检测特异性CTL。
Lynjune灵均生物四聚体优点:敏感,定量。可同时研究细胞因子产生细胞的表型。可分离纯化T细胞,不损伤细胞。
MHC四聚体制备流程:

用途:
检测HBV、FUL、CMV、EBV、HIV 和肿瘤等
外周血及组织经过荧光标记的pMHC四聚体染色,在流式细胞仪上分析,可以定量检测外周血及组织中抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)的比率,分析其表型和功能,准确检测外周血及组织中抗原特异CTL的数量。如用T-细胞亚型抗体、抗细胞因子抗体、抗T-细胞表型抗体共染特异性T-细胞,可获得更多有关此类细胞的特性。
分离纯化特异性T细胞
pMHC单体结合在磁珠上,可将特异性的T-细胞分离出来(目前仅提供 pMHC 单体)。分离出来特异性的T-细胞,在体外扩增,用于过继免疫治疗。
人类白细胞抗原(HLA)
人类主要组织相容性抗原分布在人体所有有核细胞表面, 由于该抗原首先在白细胞表面被发现,并且白细胞是进行此类抗原研究适宜材料来源,故人类主要组织相容性抗原称为人类白细胞抗原(HLA, human leucocyte antigen)。人类的MHC 位于人的6号染色体短臂上。小鼠的MHC位于小鼠的17号染色体上,被称为H-2基因。

灵均生物提供 MHC 亚型四聚体
人类 | 鼠 | 猪 | 猴 |
HLA-A | HLA-B | HLA-C | HLA-E | HLA-G | H-2 | SLA | MLA |
HLA-A*01:01 | HLA-B*18:01 | HLA-Cw*03:03 | HLA-E*01:01 | HLA-G*01:01 | H-2Db | SLA-1*07:01 | Mamu-A*01 |
HLA-A*02:01 | HLA-B*27:05 | HLA-Cw*08:02 | HLA-E*01:03 |
| H-2Dd |
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HLA-A*02:03 | HLA-B*35:01 |
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| H-2Kb |
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HLA-A*03:01 | HLA-B*40:01 |
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| H-2Kd |
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HLA-A*11:01 | HLA-B*40:02 |
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| H-2Ld |
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HLA-A*24:02 | HLA-B*57:01 |
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| H-2Dq |
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HLA-A*31:01 | HLA-B*57:03 |
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HLA-A*33:03 |
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灵均生物定制非经典 MHC 四聚体
杭州灵均生物科技有限公司具有符合GMP要求的质量控制体系,生产的pMHC四聚体能够准确、灵敏地检测特异性 T-细胞,并可根据顾客需求定制特异多肽的MHC四聚体。Lynjune灵均生物接受除以上所列 MHC I 类分子的其它亚类。
存储:
4℃保存 ,保质期1年。带有荧光标记的pMHC四聚体不可冷冻。
分离T-细胞实例
HLA-A2阳性PBMC经特异性CMV表位肽刺激10天,T-细胞被抗CD8-FITC与CMV / Epimer共染色,细胞流式仪分析(左图)。
CMV特异性T细胞被Epimer单体纯化,分离,并与滋养细胞共培养8天。 用抗CD8-FITC和CMV/Epimer共染色,流式细胞仪分析(右图)。
