MHC 四 聚 体 简 介
T 细胞免疫及应答和抗体一样，同为机体两大防御体制之一。在T细胞上表达的T细胞受体(T Cell Receptor, TCR)可以特异性识别MHC分子与肽片段的复合物(MHC/peptide complex)并与其结合。CD8阳性T细胞可以识别MHC Class 1分子与肽片段的复合物(MHC class l/peptide complex)，由于其会直接攻击、排除病毒感染细胞与癌细胞等目标细胞，因此称为细胞毒性T细胞(Cytotoxic TLymphocyte,CTL)。另一方面，CD4阳性T细胞通过识别MHC Class Il分子与肽片段的复合物(MHC class ll/peptide complex)被活化。CD4阳性T细胞主要指辅助T细胞(T helpercells, Th)，并存在以下几种:作用于承担细胞免疫的CTL、巨噬细胞等的Th1细胞，以及作用于树突状细胞与B细胞并激活体液免疫的Th2细胞。1996年，Altman等人使用MHC四聚体试剂，成功地通过流式细胞仪在单个细胞水平上对特异性T细胞进行了检测。抗原特异性T细胞原本只能通过细胞因子的产生和细胞毒性活性的确认等间接方式检测，而MHC四聚体这项突破性的技术，不仅使抗原特异性T细胞可以被直接检测和分离，也可以实现对其功能与表型等的详细分析。现在，MHC四聚体试剂作为T细胞免疫的必要监测工具，广泛应用于传染病及癌症疫苗。疗法、细胞免疫疗法、移植免疫、自身免疫疾病等基础研究或临床开发领域中。
使用 MHC 四聚体检测抗原特异性 T 细胞的原理
在抗原呈递细胞(antigen-presenting cell, APC)内部被加工的特定多肽序列，通过 APC 上表达的 MHCT 细胞受体分子被呈递到细胞表面形成 MHC/多肽复合物，T 细胞受体(TCR)可以识别 MHC/多肽复合物，通过与其结合激活 T 细胞。根据该原理，可以利用 MHC/多肽复合检测抗原特异性 T 细胞。但是，当 MHC/多肽复合物处于单体(Monomer)状态时，对 TCR 的亲和性较低，且二者的结合不稳定，因此很难将单体作为检测工具使用。若将 MHC/多肽复合物生物素化，通过链霉亲和素将 MHC/多肽复合物单体四聚体(Tetramer)化,就可以使其与TCR 保持在一个稳定的结合状态，成为可以利用的检测工具。T-Select MHCTetramer 使用了 FITC、PE、APC(别藻蓝蛋白)或 BV421 等荧光物质标记，因此可以使用流式细胞仪或焚光显徽镜检测抗頁特异性 T 细胞。
应用
1. 定量检测外周血、组织中及T-细胞扩增培养中抗原特异性CTL的比率，并对其进行表型及功能分析外周血、组织及T-细胞扩增培养物经过荧光标记的MHC/表位肽Tetramer染色，在细胞流式仪上分析，我们可以准确检测其中抗原特异性T－细胞的数量。如结合表型抗体，细胞因子抗体共染特异性T-细胞，我们还将获得更多有关此类细胞的特性。
2. 分离T-细胞
a) 细胞流式方法：
用MHC Tetramer染色细胞，借用流式细胞仪分选染色阳性细胞，收集细胞。
b) 将MHC/表位肽复合物单体（Monomer) 通过其上带有的biotin 结合到Avidin标记的磁珠上，将该试剂染待分离细胞，通过磁铁棒将结合有Monomer的特异性T- 细胞分选出来，对细胞的进一步分析或在体外扩增用于过继免疫治疗。
